革新的な分解能で細胞解析をサポートするコンパクトフローサイトメーター
CytoFLEXファミリーは、最適なレーザー励起と蛍光検出系により少ない光ロスと高感度を実現した革命的なコンパクトフローサイトメーターです。電気通信の先進技術を採用し、進化を続けるCytoFLEXファミリーは、研究者の細胞解析における選択肢を拡げます。
特長
３つのモデル
CytoFLEXファミリーには搭載レーザー数の異なる3つのモデルがあり、各モデルは、レーザーと検出器の数の組み合わせによって製品シリーズに分かれています。CytoFLEXファミリーは、納品時からレーザーと検出器をフルスペックで搭載しており、USBキー（ドングル）により性能を決めています。
USBキーを変えるだけで簡単にアップグレードを行うことができるため、まずは必要なレーザー構成とパラメータ数を選択していただき、将来的に研究の変化に応じて簡単にパラメータを追加することができます。
研究に集中できる環境
CytoFLEXファミリーは、簡単な操作で必要なデータが得られます。つまり、機器の操作ではなく、研究だけに集中することができます。そして、単純な解析から複雑な解析、さらにフローサイトメーターの限界に挑戦するような高度な解析まで、研究の様々な要望にお応えします。
13カラーイムノフェノタイピングによるヒト末梢血 T細胞サブセット解析
細胞機能、分化、活性化に関連した細胞表面抗原を用いたT細胞サブセット解析は、様々なポピュレーションを検出するために複数のマーカーが必要とされます。死細胞除去のためにIR チャンネルを使用すると、ほかのチャンネルを一般的な細胞表面マーカー解析のために活用できるようになります。さらに、相対的に明るいCD8のようなマーカーをIRチャンネルにすることで、蛍光間の漏れ込みを少なくし、弱陽性のマーカーの検出を容易にすることができます。
優れた高感度
CytoFLEXファミリーの優れた高感度は、独自の技術により作り上げられています。電気通信における先進技術を取り入れたWavelength Division Multiplexer（WDM）により、複数の蛍光波長を分別し測定します。WDMはファイバーオプティクスと光波長を分別するバンドパスフィルターから構成され、従来のフローサイトメーターとは異なり、光波長を分別するために必要だった複数のダイクロイックフィルターは不要となりました。これにより、蛍光チャンネルの設定が容易になるだけではなく、屈折による光ロスが少なくなることで、蛍光検出効率を高めます。また、WDMは検出器としてAvalanche Photodiode detectors（APD）を用いており、800 nm以上の長波長領域でも80％を上回る高い量子効率であることが特長です。
感度を上げるもう一つの構成要素は、光をフローセルにフォーカスさせる光ICの使用です。従来のフローサイトメーターでは、レーザーフォーカスに、組み合わせたレンズとフィルターを用います。これらの光の相互作用は、光ロスを起こす可能性がありましたが、CytoFLEXは、光ICの採用により光ロスを少なくします。CytoFLEXファミリーは、WDM、APD、光IC技術などの採用により、効率的な光学系を確立し、高感度なフローサイトメーターを実現しました。
ナノ粒子検出
ナノ粒子サイズ測定におけるフローサイトメーターの進歩により、以前は推測するだけであった疑問に答えが出るようになります。CytoFLEXファミリーは、ナノ粒子サイズの検出に加え、フェノタイプの検出、同時に多くの細胞数をカウントできる性能、レアイベントの検出などのフローサイトメーターの基本性能により、細胞外小胞のようなナノ粒子の研究において、素晴らしいフローサイトメーターとなるでしょう。
青、または紫レーザーの側方散乱光を用いた培養細胞の細胞外小胞（Microparticle：MP）の検出例
側方散乱光の設定を最適化するためにデザインされた特別な蛍光サブミクロン ポリスチレンビーズにより、機器設定を標準化しました。Megamix-Plus FSC & Megamix-Plus SSC（BioCytex Refs # 7802 and # 7803 respectively）は、V/Vで混合し、Gigamixを作りました。Gigamixには、SMP（Submicron particles）検出のために7つのリファレンスビーズ（900 nm、500 nm、300 nm、240 nm、200 nm、160 nm、100 nm）と、さらなるナノ粒子解析性能を確認するため75 nmのポリスチレンビーズを添加し作成しました。ゲートは、Gigamix混合ビーズの集団を用いて設定しました（パネルA：488 nm側方散乱光（SSC）、パネルB：405 nm 側方散乱光（VSSC））。次いで、488 nm SSCまたは、405 nm VSSC を用いて精製した BxPC3 細胞（膵臓由来）から生成した細胞外小胞を測定しました。リファレンスビーズを用い488 nmSSCと405 nmVSSCの両方のチャンネルで、2つのゲート（“Large MP”：0.6 ～ 0.22 µm ビーズ、“MP”：0.6～0.22 µm ビーズ）を設定しました。分解能の高い VSSCチャンネルには、2つのゲート（“S100”：0.6 ～ 0.1 µm ビーズ、“Max”：0.6～0.08 µm ビーズ）を追加設定しました。新しい検出下限値は、75 nm と 100 nm の間に設定されました。
Annexin-V-FITC と SBTF1-PE（CD142）の2パラメータープロットにおいて、標準の 488 nm SSCと405 nm VSSCの“MP”ゲートでは、ダブルポジティブのイベントは、同じになりました（パネル C：3,690イベント、パネル F：3,606 イベント）。しかし、VSSCを用いた新しい広いゲート（“S100”と “Max”）では、より多いイベント数となりました（パネル G：13,333イベント、パネル H：16,322 イベント）。このように CytoFLEXファミリーは、“細胞外小胞の氷山”の詳細発見のための扉を開けることができます。
データ提供：BioCytex 社 Stago Group Philippe Poncelet 氏、Aix-Marseille 大学 VRCM Stéphane Robert 氏のご厚意による。
データ詳細は、CYTO 2016のポスター発表“Submicron particle analysis and counting is highly favored by the use of side scatter from the violet laser on the CytoFLEX fl ow cytometer”をご参照ください。
直線性とコンペンセーション
CytoFLEXファミリーは、高い再現性のAPD（Avalanche Photodiode detector）を使用することで、蛍光強度と検出器のゲイン値の間に直線性をもたせました。APDのもつゲイン直線性は、実験系に合わせてゲイン値を変更しても、自動的に蛍光間のコンペンセーション（漏れ込み補正）値を最適化することができます。マルチカラー測定の際は、様々なゲイン値で得られたコンペンセーション値を組み合わせて使用することもできます。
CytExpertソフトウエア
CytExpertソフトウエアは、初心者からエキスパートまでのあらゆる研究者が容易に操作でき、さらに論文や報告書に使用できる高品質な結果を提供します。ソフトウエアは3つのインストールオプションがあります。ユーザーログインの操作が不要な「デフォルトタイプ」、ユーザー管理機能のある「ユーザーマネージメントタイプ」、そして、21 CFR Part1 1 の要求事項に対応した「電子署名対応タイプ」があります。電子署名対応タイプでは、電子記録、電子署名、ユーザー識別、許可、電子署名、記録の完全性、オペレーションと操作のログ、監査証跡などの機能があります。
CytExpertソフトウエアのアプリケーションの標準化機能は、QCビーズを用いて、自動的にターゲット値になるようゲイン設定を行い、日間差、施設間差を少なくします。アプリケーションごと、QCビーズのロットごとにターゲット値をライブラリーすることができるので、複数のアプリケーションの標準化の管理もできます。自動スレッシュホールド機能により、目的細胞集団を見つけ出し、オートアジャスト機能で細胞をプロット上に最適に表示できます。さらにオートゲート機能で細胞集団のゲーティング容易です。
動作環境
| CPU | 第４世代インテル Core™i3 (3MB cache,290 GHz)同時以上 |
| OS | windows7,8,10 Professional, 64 bit |
| メモリー | 4 GB RAM 以上 |
| ハードディスク容量 | 解析のみの場合は、1GB以上空き容量 / データ取得の場合は、10GB以上 空き容量 推奨 |
| モニタ | 解像度:1,920 × 1,090 以上 推奨 |
| USB ポート | データ取得時 USB2.0以上 |
| ライセンス形態 | USBドングル（データ取得）/ ライセンスフリー (データ解析) |
仕様
| CytoFLEXファミリー | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| モデル | CytoFLEX LX | CytoFLEX S | CytoFLEX | |||||
| シリーズ | Blue-Red- Violet- Yellow Green-Near UV-Infrared （B-R-V-Y-N-I） |
Blue-Red- Violet- Yellow Green-UV- Infrared （B-R-V-Y-U-I） |
Blue-Red- Violet- Yellow Green （ B-R-V-Y） |
Blue-Red- Violet-Near UV （B-R-V-N） |
Blue-Red- Violet- Infrared （B-R-V-I） |
Blue-Violet- Yellow Green-Near UV （B-V-Y-N） |
Blue-Red- Violet （B-R-V） |
|
| 搭載レーザー | 488 nm：50 mW | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ |
| 638 nm：50 mW | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | - | ○ | |
| 405 nm：80 mW | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ | |
| 561 nm：30 mW | ○ | ○ | ○ | - | - | ○ | - | |
| 375 nm：60 mW | ○ | - | - | ○ | - | ○ | - | |
| 355 nm：20 mW | - | ○ | - | - | - | - | - | |
| 808 nm：60 mW | ○ | ○ | - | - | ○ | - | - | |
| 検出器 前方散乱光 | 前方散乱光：Si-フォトダイオード 側方・蛍光： Avalanche Photo Diode detector arrays （FAPD：Fiber Array Photo Detector) |
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| 散乱光 | 前方散乱光：1個、 側方散乱光：1個 | |||||||
| 蛍光検出 | 最大21個 | 最大13個 | 最大12個 | 最大13個 | ||||
| 蛍光検出感度 | FITC：＜30MESF、PE：＜10MESF （488 nmレーザー使用時） | |||||||
| 蛍光分解能 | rCV＜3％ | |||||||
| 散乱光分解能 | リンパ球、単球、顆粒球の3分画に分離可能 | |||||||
| 最小検出粒子径 | 488 nm 側方散乱光 0.3 µm 405 nm 側方散乱光 80 nm |
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| 解析速度 | 30,000イベント/秒 | |||||||
| サンプルフローレート | Slow：10 µL/min、Medium：30 µL/min、Fast：60 µL/min 10 ～240 µL/minで可変 |
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| 寸法・重量 | 本体：733（W）x 605（D） ｘ 451（H）mm、79 kg |
本体：425（W）x 425（D）ｘ 340（H）mm、23.4 kg | ||||||
| 消費電力 | 150 ～250W（使用レーザーによる） | |||||||
| 設置条件 | 15 ～27℃（結露しないこと） | |||||||
| オプション | プレートローダー（本体内蔵） Kaluzaソフトウエア |
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レーザーおよび蛍光検出器の構成
CytoFLEX Blue-Red-Violet（B-R-V）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
638 nm (Red) |
405 nm (Violet) |
|---|---|---|---|---|---|
| B53000 | 3 | 13 | 5 | 3 | 5 |
| B53001 | 3 | 12 | 5 | 3 | 4 |
| B53002 | 3 | 12 | 4 | 3 | 5 |
| B53003 | 3 | 11 | 4 | 3 | 4 |
| B53004 | 3 | 11 | 3 | 3 | 5 |
| B53006 | 3 | 10 | 4 | 3 | 3 |
| B53005 | 3 | 10 | 5 | 3 | 2 |
| B53037 | 2 | 10 | 5 | 5 | |
| B53007 | 3 | 9 | 3 | 3 | 3 |
| B53008 | 3 | 9 | 4 | 3 | 2 |
| B96622 | 2 | 8 | 5 | 3 | |
| B53009 | 3 | 8 | 3 | 3 | 2 |
| C02945 | 3 | 8 | 4 | 2 | 2 |
| B53010 | 3 | 7 | 3 | 2 | 2 |
| B53011 | 2 | 6 | 3 | 3 | |
| B53013 | 2 | 6 | 4 | 2 | 3 |
| B53012 | 2 | 6 | 3 | ||
| C02944 | 2 | 6 | 4 | 2 | |
| C02946 | 3 | 6 | 2 | 2 | 2 |
| B53018 | 1 | 5 | 5 | ||
| B53014 | 2 | 5 | 3 | 2 | |
| B53019 | 1 | 4 | 4 | ||
| B53015 | 2 | 4 | 3 | 1 | |
| B53016 | 2 | 4 | 2 | 2 | |
| B53017 | 2 | 4 | 2 | 2 |
CytoFLEX S Blue-Red-Violet-Yellow Green（B-R-V-Y）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
638 nm (Red) |
405 nm (Violet) |
561 nm (Yellow Green) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| B75408 | 4 | 13 | 2 | 3 | 4 | 4 |
| B96620 | 3 | 10 | 2 | 4 | 4 | |
| B75811 | 3 | 9 | 2 | 3 | 4 | |
| B96621 | 4 | 9 | 2 | 2 | 2 | 3 |
| C02948 | 3 | 9 | 2 | 3 | 4 | |
| B75812 | 2 | 6 | 2 | 4 | ||
| C02947 | 3 | 6 | 2 | 2 | 2 |
CytoFLEX S Blue-Red-Violet-Near UV（B-R-V-N）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
638 nm (Red) |
405 nm (Violet) |
375 nm (Near UV) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| B78557 | 4 | 13 | 5 | 3 | 3 | 2 |
| B78559 | 3 | 10 | 5 | 3 | 2 | |
| B78558 | 2 | 6 | 4 | 2 |
CytoFLEX S Blue-Red-Violet-Infrared（B-R-V-I）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
638 nm (Red) |
405 nm (Violet) |
808 nm (Infrared) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| C01161 | 4 | 13 | 4 | 3 | 4 | 2 |
| C01160 | 3 | 10 | 4 | 4 | 2 | |
| C01159 | 3 | 9 | 4 | 3 | 2 | |
| C01158 | 2 | 6 | 4 | 2 |
CytoFLEX S Blue-Violet-Yellow Green-Near UV（B-V-Y-N）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
405 nm (Violet) |
561 nm (Yellow Green) |
375 nm (Near UV) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| B78560 | 4 | 12 | 2 | 4 | 4 | 2 |
| B96619 | 3 | 10 | 2 | 4 | 4 | |
| B78561 | 3 | 8 | 2 | 4 | 2 | |
| B96618 | 2 | 6 | 2 | 4 | ||
| C02949 | 2 | 4 | 2 | 2 |
CytoFLEX LX Blue-Red-Violet-Yellow Green-Near UV-Infrared（B-R-V-Y-N-I）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 nm (Blue) |
638 nm (Red) |
405 nm (Violet) |
561 nm (Yellow Green) |
375 nm (Near UV) |
808 nm (Infrared) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| C00445 | 6 | 21 | 3 | 3 | 5 | 5 | 3 | 2 |
| C00446 | 5 | 19 | 3 | 3 | 5 | 5 | 3 |
CytoFLEX LX Blue-Red-Violet-Yellow-UV-Infrared（B-R-V-Y-U-I）シリーズ
| 製品番号 | レーザー | 蛍光チャンネル数 | 488 NM (Blue) |
638 NM (Red) |
405 NM (Violet) |
561 NM (Yellow Green) |
355 NM (UV) |
808 NM (Infrared) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| C11186 | 6 | 21 | 3 | 3 | 5 | 5 | 3 | 2 |
| C11185 | 5 | 19 | 3 | 3 | 5 | 5 | 3 | |
| C11183 | 4 | 14 | 3 | 3 | 5 | 3 | ||
| C11184 | 4 | 14 | 3 | 5 | 3 | 3 |
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