培養細胞から高収率でインタクトなTotal RNAの抽出

Agencourt RNAdvance Cell v2は、独自の核酸精製法SPRI(Solid Phase Reversible Immobilization)技術を利用した、磁性ビーズによる培養細胞からのトータルRNA抽出・精製キットです。 遠心やフィルトレーションを行うことなく、高い精製度と高収率でRNAの精製を行うことが可能です。また、自動分注機Biomek を用いた自動化にも適しており、マイクロアレイやリアルタイムPCR用のトータルRNAの精製プロセスの自動化に最適です。

Agencourt RNAdvance Cell v2

特長

  • 96ウェルプレートフォーマットでの抽出・精製に最適
  • 5 x 104 Cellまでの培養細胞からのインタクトなTotal RNA抽出 
    (5 x 104 Cell 以上の細胞にはAgencourt RNAdvance Tissueをご利用ください)
  • 様々なダウンストリームの用途に使用可能な高い精製度
  • 効率的なDNAおよび夾雑物の除去
  • Biomekによる自動化にも最適

高収量・高精製度

Agencourt RNAdvance Cell v2は、高い収率と精製度を実現します。5×104 の細胞からのRNA抽出の結果、他社、スピンカラム法、磁気ビーズ法による抽出と比較していずれの細胞種からでも高い収率を示しました(図1)。さらに抽出されたRNAの精製度をAgilent Bioanalyzerを用いて比較したところ、分解が少なく高い精製度でRNAが回収されています(図2)。

図1. 各社抽出キットによる各種細胞種から抽出したRNA収量の比較
5×104 のHEK293、HeLa、Cos細胞から、RNAdvance Cell v2及び他社RNA抽出キットを使用し、抽出したRNAの収量
図2. 各社抽出キットによるHeLa細胞からの抽出したRNAの精製度の比較
5×104 のHeLa細胞から、RNAdvance Cell v2及び他社RNA抽出キットにより抽出したRNAの精製度。Agilent Bioanalyzer 2100 RNA NanoChipにより測定。 RIN(RNA Integrity Number)値はn=5。

少量の細胞からでも一貫したRNA抽出

Agencourt RNAdvance Cell v2は、少量の細胞からでもRNA抽出可能で、高い精製度で一貫したデータを得ることが可能です。様々な細胞数から抽出したRNAからのRT-PCRの結果でも、細胞数と高い相関が得られ、一貫した抽出効率と阻害物の影響を受けない高い精製度が示されています(図3)。

図3. 各細胞量の細胞から抽出したRNAのqRT-PCRの結果
25 - 5×104 のHeLa細胞から、RNAdvance Cell v2を使用し抽出したRNAを18s RNAを対象にqRT-PCRを行い、それぞれのCt値をプロットした。

大量処理も可能な効率の良いプロセス

RNAdvance Cell v2は磁性ビーズを用いており、96ウェルベースでの大量処理にも適しています。
ベックマン・コールターの自動分注機Biomekシリーズによる自動化も可能です。Biomek FXPを用いれば、192サンプルからのRNA抽出を、約2時間15分で処理可能です。
Biomekによる自動化の詳細

実験ステップ

  • 1:  培養細胞の培地を除去
  • 2:  Lysis Buffer及びProteinase Kを加え、細胞を溶解
  • 3:  新しい容器に移し、Bind Bufferを添加しRNAをSPRIビーズに結合
  • 4:  SPRIビーズをマグネットで分離し、夾雑物を除く。続いてWash Buffer及びエタノールを加え洗浄
  • 5:  DNaseを加える(オプション)
  • 6:  Wash Buffer(Re-Binding Buffer)を加え、洗浄
  • 7:  エタノールで洗浄
  • 8:  SPRIビーズに結合した核酸を溶出

仕様

内容構成

  • Lysis Buffer
  • Bind Buffer
  • Wash Buffer (Re-Binding Buffer)
  • Proteinase K
  • Proteinase K Buffer

マニュアル・SDSなど

アプリケーションノート

Order Information

製品名 サイズ 製品番号 価格(税別)
Agencourt RNAdvance Cell v2 96 Preps A47942 ¥50,000
960 Preps A47943 ¥250,000

マグネットアクセサリ

使用時に必要です。

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