高速型フローサイトメータと
従来型フローサイトメータの違い

高速型FCMは、多くの細胞を短時間で流すために、従来型FCMよりも高圧でシース液を押し出して、高速でサンプルを流します。また、同時通過を最少化するため、従来機よりも細長いスリット形のレーザ光束を照射します。各検出器のシグナルは、測定感度や測定精度を向上させるために、サンプリング周波数は従来機の2.5倍の分解能の0.04µ秒ごと(1秒間に2,500万回、サンプリングされます。従来機は、1,000万回)に、さらにシグナル強度は、従来機の4倍の分解能の65,536レベル(16ビット)でデジタル化されます。ふたつ合わせて、従来機の10倍の分解能でデジタルデータを取得し、高速でかつ高精度です。従来機より高速のDSP(デジタルシグナルプロセッサー)により、各細胞からのシグナルの面積や幅、高さが高速演算処理され、最終的には、最大値16,777,216のリニアデータ(数値)になります。その後、高速DSPで数学的に4桁のログ変換やフルマトリクス蛍光補正が行われます。高速コンピュータに各パラメーター(各4096チャンネル)が高速転送され、これらのパラメーターを用いて、リアルタイムで解析を行います。
1秒間に70,000個までのシグナルを取得でき、短時間の測定で高精度な測定データを取得できます。
高速型FCMは、マルチカラー測定など存在比率の少ない希少細胞測定の高精度化を実現します。

従来型FCM 3レーザ8カラー
従来型FCM 3レーザ8カラー

1. 高速型デジタルFCMは、シグナルパルスを従来型デジタルFCMの10倍の分解能で処理します。そのため、正確な陰性ピークを測定できます。

高速型FCM CyAn ADP

2. 高速型デジタルFCMは、従来型FCMの7倍以上の測定スピードで、サンプルを測定します。そのため、高精度なハイスループット アナリシスを実現できます。

測定精度3%を実現するための測定時間の目安
蛍光数 組み合わせ 平均陽性率 必要目的細胞数 Total count 必要測定時間
5,000個/秒 50,000個/秒
5カラー 32通り 3.12% 35,552 142,208 28秒 3秒
6カラー 64通り 1.56% 71,104 284,416 57秒 6秒
7カラー 128通り 0.78% 142,221 568,884 1分54秒 11秒
8カラー 256通り 0.39% 284,442 1,137,768 3分48秒 23秒
9カラー 512通り 0.20% 568,883 2,275,532 7分25秒 46秒

平均陽性率 : 100%÷組み合わせ数
必要細胞数 : 測定精度3%(CV値)に必要な目的細胞数(ゲート内細胞数)
Total count : 目的細胞集団が全体の25%の場合の全測定数

3. 高速型デジタルFCMは、シグナルパルスを高精度で積分処理(面積シグナル)をするので、凝集したダブレット細胞やトリプレットを正確に検出できます。

性能比較表

  高速型FCM CyAn ADP 従来型FCM
レーザービーム照射 セパレートビームスポット方式
プリズムによる異軸照射
セパレートビームスポット方式
光ファイバーによる異軸照射
搭載レーザー 青色:25mW 488 nm 固体レーザー
赤色:60mW 642 nm 半導体レーザー
紫色:50mW 405 nm 半導体レーザー(オプション)
青色:20mW 488 nm 固体レーザー
赤色:17mW 633 nm HeNeガスレーザー
紫色:30mW 405 nm 半導体レーザー(オプション)
光ファイバーによる光損失 なし(使用していない) 減衰あり(レーザー光導入、蛍光導入ともに使用)
サンプル解析
速度
最大 70,000 イベント/秒 最大 10,000 イベント/秒
最大測定
細胞数
1億個まで 350万個まで
波形処理
分解能
25MHz(0.04µ秒間隔)、
16ビット(65,536レベル)
10MHz(0.1µ秒間隔)、
14ビット(16,384レベル)
パルス処理 高さ、面積、幅の測定が可能 高さ、面積、幅の測定が可能
信号解像度 16,777,216チャンネル (24ビット) 262,144チャンネル (18ビット)
低解像度
検出器 前方散乱光、側方散乱光、7個の蛍光(最大9個) 前方散乱光、側方散乱光、6個の蛍光(最大8個)
前方散乱
光検出感度
0.5µm 1µm
蛍光検出感度 FITC:100MEFS以下、
PE:50MEFS以下
FITC:100MEFS以下、
PE:50MEFS以下
蛍光補正 9 x 9 フルマトリックス
すべての蛍光検出器間で可能
高精度自動コンペンセーション機能内蔵
8 x 8 フルマトリックス
すべての蛍光検出器間で可能
高精度自動
蛍光補正
高精度自動コンペンセーション機能ADC 不可能(信号解像度が低解像度のため)
サンプルフロー
レート
最大150µL/秒、最少10µL/秒 (無段階) 最大120µL/秒、最少10µL/秒 (3段階)
オペレーティング
システム
Windows® XP Windows® XP
寸法・重量
(サイトメーター)
30cm (幅) x 45cm (奥行) x 40cm (高さ) 38Kg 91cm (幅) x 61cm (奥行) x 64cm (高さ) 146Kg
寸法・重量
(送液カート)
73cm (幅) x 62cm (奥行) x 62cm (高さ) 52Kg 79cm (幅) x 61cm (奥行) x 64cm (高さ) 51Kg
モニター&PC 24インチワイド液晶モニター、
Dual Core PC
液晶モニター、 PC
電源 100V 6A 50/60Hz 100V 5A 50/60Hz
   

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